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常见缓冲液配制方法

已有 1631 次阅读2008-4-7 21:48 |个人分类:专业知识

乙醇－醋酸铵缓冲液(pH3.7) 取5mol/L醋酸溶液15.0ml，加乙醇60ml和水20ml,用10mol/L氢氧化铵溶液调节pH值至3.7，用水稀释至1000ml，即得。
　　三羟甲基氨基甲烷缓冲液(pH8.0) 取三羟甲基氨基甲烷12.14g,加水800ml,搅拌溶解，并稀释至1000ml,用6mol/L盐酸溶液调节pH值至8.0,即得。
　　三羟甲基氨基甲烷缓冲液(pH8.1) 取氯化钙0.294g,加0.2mol/L三羟甲基氨基甲烷溶液40ml使溶解，用1mol/L盐酸溶液调节pH值至8.1，加水稀释至100ml，即得。
　　三羟甲基氨基甲烷缓冲液(pH9.0) 取三羟甲基氨基甲烷6.06g,加盐酸赖氨酸3.65g、氯化钠5.8g、乙二胺四醋酸二钠0.37g，再加水溶解使成1000ml，调节pH值至9.0，即得。
　　乌洛托品缓冲液取乌洛托品75g，加水溶解后，加浓氨溶液4.2ml，再用水稀释至250ml,即得。
　　巴比妥缓冲液(pH7.4)　取巴比妥钠4.42g,加水使溶解并稀释至400ml，用2mol/L盐酸溶液调节pH值至7.4，滤过，即得。
　　巴比妥缓冲液(pH8.6)　取巴比妥5.52g与巴比妥钠30.9g,加水使溶解成2000ml，即得。
　　巴比妥－氯化钠缓冲液(pH7.8)　取巴比妥钠5.05g,加氯化钠3.7g及水适量使溶解,另取明胶0.5g加水适量，加热溶解后并入上述溶液中。然后用0.2mol/L盐酸溶液调节pH值至7.8，再用水稀释至500ml，即得。
　　甲酸钠缓冲液(pH3.3) 取2mol/L甲酸溶液25ml，加酚酞指示液1滴，用2mol/L氢氧化钠溶液中和，再加入2mol/L甲酸溶液75ml,用水稀释至200ml,调节pH值至3.25～3.30,即得。
　　邻苯二甲酸盐缓冲液(pH5.6) 取邻苯二甲酸氢钾10g，加水900ml,搅拌使溶解，用氢氧化钠试液(必要时用稀盐酸)调节pH值至5.6,加水稀释至1000ml，混匀，即得。
　　枸橼酸盐缓冲液取枸橼酸4.2g,加1mol/L的20％乙醇制氢氧化钠溶液40ml使溶解,再用20％乙醇稀释至100ml，即得。
枸橼酸盐缓冲液(pH6.2) 取2.1％枸橼酸水溶液，用50％氢氧化钠溶液调节pH值至6.2，即得。
　　枸橼酸－磷酸氢二钠缓冲液(pH4.0) 甲液：取枸橼酸21g或无水枸橼酸19.2g,加水使溶解成1000ml，置冰箱内保存。乙液：取磷酸氢二钠71.63g，加水使溶解成1000ml。取上述甲液61.45ml与乙液38.55ml混合，摇匀，即得。
　　氨－氯化铵缓冲液(pH8.0) 取氯化铵1.07g，加水使溶解成100ml，再加稀氨溶液(1→30)调节pH值至8.0，即得。
　　氨－氯化铵缓冲液(pH10.0) 取氯化铵5.4g，加水20ml溶解后，加浓氯溶液35ml，再加水稀释至100ml，即得。
　　硼砂－氯化钙缓冲液(pH8.0) 取硼砂0.572g与氯化钙2.94g，加水约800ml溶解后,用1mol/L盐酸溶液约2.5ml调节pH值至8.0，加水稀释至1000ml，即得。
　　硼砂－碳酸钠缓冲液(pH10.8～11.2) 取无水碳酸钠5.30g,加水使溶解成1000ml；另取硼砂1.91g，加水使溶解成100ml。临用前取碳酸钠溶液973ml 与硼砂溶液27ml，混匀，即得。
　　硼酸－氯化钾缓冲液(pH9.0) 取硼酸3.09g,加0.1mol/L氯化钾溶液500ml使溶解，再加0.1mol/L氢氧化钠溶液210ml，即得。
　　醋酸盐缓冲液(pH3.5) 取醋酸铵25g，加水25ml溶解后，加7mol/L盐酸溶液38ml，用2mol/L盐酸溶液或5mol/L氨溶液准确调节pH值至3.5(电位法指示),用水稀释至100ml,即得。
　　醋酸－锂盐缓冲液(pH3.0) 取冰醋酸50ml，加水800ml混合后，用氢氧化锂调节pH值至3.0，再加水稀释至1000ml，即得。
　　醋酸－醋酸钠缓冲液(pH3.6) 取醋酸钠5.1g,加冰醋酸20ml，再加水稀释至250ml,即得。
　　醋酸－醋酸钠缓冲液(pH3.7)　取无水醋酸钠20g,加水300ml溶解后，加溴酚蓝指示液1ml及冰醋酸60～80ml，至溶液从蓝色转变为纯绿色，再加水稀释至1000ml，即得。
　　醋酸－醋酸钠缓冲液(pH3.8)　取2mol/L醋酸钠溶液13ml与2mol/L醋酸溶液87ml,加每1ml含铜1mg的硫酸铜溶液0.5ml,再加水稀释至1000ml，即得。
　　醋酸－醋酸钠缓冲液(pH4.5) 取醋酸钠18g,加冰醋酸9.8ml,再加水稀释至1000ml,即得。
醋酸－醋酸钠缓冲液(pH4.6) 取醋酸钠5.4g,加水50ml使溶解，用冰醋酸调节pH值至4.6，再加水稀释至100ml，即得。
　　醋酸－醋酸钠缓冲液(pH6.0) 取醋酸钠54.6g，加1mol/L醋酸溶液20ml溶解后，加水稀释至500ml，即得。
　醋酸－醋酸钾缓冲液(pH4.3) 取醋酸钾14g，加冰醋酸20.5ml，再加水稀释至1000ml，即得。
　　醋酸－醋酸铵缓冲液(pH4.5) 取醋酸铵7.7g，加水50ml溶解后，加冰醋酸6ml与适量的水使成100ml，即得。
　　醋酸－醋酸铵缓冲液(pH6.0) 取醋酸铵100g，加水300ml使溶解，加冰醋酸7ml,摇匀，即得。
　　磷酸－三乙胺缓冲液取磷酸约4ml与三乙胺约7ml，加50％甲醇稀释至1000ml，用磷酸调节pH值至3.2，即得。
　　磷酸盐缓冲液取磷酸二氢钠38.0g，与磷酸氢二钠5.04g,加水使成1000ml,即得。
　　磷酸盐缓冲液(pH2.0) 甲液:取磷酸16.6ml，加水至1000ml，摇匀。乙液：取磷酸氢二钠71.63g，加水使溶解成1000ml。取上述甲液72.5ml与乙液27.5ml混合，摇匀，即得。
　　磷酸盐缓冲液(pH2.5) 取磷酸二氢钾100g，加水800ml，用盐酸调节pH至2.5,用水稀释至1000ml。
　　磷酸盐缓冲液(pH5.0) 取0.2mol/L磷酸二氢钠溶液一定量,用氢氧化钠试液调节pH值至5.0，即得。
　　磷酸盐缓冲液(pH5.8) 取磷酸二氢钾8.34g与磷酸氢二钾0.87g,加水使溶解成1000ml，即得。
　　磷酸盐缓冲液(pH6.5) 取磷酸二氢钾0.68g,加0.1mol/L氢氧化钠溶液15.2ml，用水稀释至100ml，即得。
　　磷酸盐缓冲液(pH6.6) 取磷酸二氢钠1.74g、磷酸氢二钠2.7g与氯化钠1.7g，加水使溶解成400ml，即得。
　　磷酸盐缓冲液(含胰酶)(pH6.8) 取磷酸二氢钾6.8g,加水500ml使溶解,用0.1mol/L
　　氢氧化钠溶液调节pH值至6.8；另取胰酶10g，加水适量使溶解，将两液混合后,加水稀释至1000ml，即得。
　　磷酸盐缓冲液(pH6.8) 取0.2mol/L磷酸二氢钾溶液250ml，加0.2mol/L氢氧化钠溶液118ml，用水稀释至1000ml，摇匀，即得。
　　磷酸盐缓冲液(pH7.0) 取磷酸二氢钾0.68g，加0.1mol/L氢氧化钠溶液29.1ml，用水稀释至100ml，即得。
　　磷酸盐缓冲液(pH7.2) 取0.2mol/L磷酸二氢钾溶液50ml与0.2mol/L氢氧化钠溶液35ml，加新沸过的冷水稀释至200ml，摇匀，即得。
　　磷酸盐缓冲液(pH7.3) 取磷酸氢二钠1.9734g与磷酸二氢钾0.2245g,加水使溶解成1000ml，调节pH值至7.3，即得。
　　磷酸盐缓冲液(pH7.4) 取磷酸二氢钾1.36g，加0.1mol/L氢氧化钠溶液79ml，用水稀释至200ml，即得。
　　磷酸盐缓冲液(pH7.6) 取磷酸二氢钾27.22g，加水使溶解成1000ml，取50ml，加0.2mol/L氢氧化钠溶液42.4ml，再加水稀释至200ml，即得。
　　磷酸盐缓冲液(pH7.8) 甲液：取磷酸氢二钠35.9g，加水溶解，并稀释至500ml。
　　乙液：取磷酸二氢钠2.76g，加水溶解，并稀释至100ml。取上述甲液91.5ml与乙液8.5ml混合，摇匀，即得。
　　磷酸盐缓冲液(pH7.8～8.0) 取磷酸氢二钾5.59g与磷酸二氢钾0.41g，加水使溶解成1000ml，即得。

标准缓冲液pH值与温度对照表

温度 ℃	四草酸氢钾 0.05M	邻苯二甲酸氢钾 0.05M	混合磷酸盐 0.025M	硼砂 0.01M
5	1.67	4.00	6.95	9.39
10	1.67	4.00	6.02	9.33
15	1.67	4.00	6.90	9.28
20	1.68	4.00	6.88	9.23
25	1.68	4.00	6.86	9.18
30	1.68	4.01	6.85	9.14
35	1.69	4.02	6.84	9.11

常用缓冲溶液的配制方法

1．甘氨酸–盐酸缓冲液（0.05mol/L）

X毫升0.2 mol/L甘氨酸+Y毫升0.2 mol/L HCI，再加水稀释至200毫升

2.0

2.4

2.6

2.8

44.0

32.4

24.2

16.8

3.0

3.2

3.4

3.6

11.4

8.2

6.4

5.0

甘氨酸分子量 = 75.07，0.2 mol/L甘氨酸溶液含15.01克/升。

2．邻苯二甲酸–盐酸缓冲液（0.05 mol/L）

X毫升0.2 mol/L邻苯二甲酸氢钾 + 0.2 mol/L HCl，再加水稀释到20毫升

pH(20℃)

2.2

2.4

2.6

2.8

3.0

4.070

3.960

3.295

2.642

2.022

3.2

3.4

3.6

3.8

1.470

0.990

0.597

0.263

邻苯二甲酸氢钾分子量 = 204.23，0.2 mol/L邻苯二甲酸氢溶液含40.85克/升

3．磷酸氢二钠–柠檬酸缓冲液

0.2mol/L Na2HPO4

（毫升）

0.1mol/L

柠檬酸

（毫升）

0.2mol/L Na2HPO4

（毫升）

0.1mol/L

柠檬酸

（毫升）

2.2

2.4

2.6

2.8

3.0

3.2

3.4

3.6

3.8

4.0

4.2

4.4

4.6

4.8

5.0

0.40

1.24

2.18

3.17

4.11

4.94

5.70

6.44

7.10

7.71

8.28

8.82

9.35

9.86

10.30

10.60

18.76

17.82

16.83

15.89

15.06

14.30

13.56

12.90

12.29

11.72

11.18

10.65

10.14

9.70

5.2

5.4

5.6

5.8

6.0

6.2

6.4

6.6

6.8

7.0

7.2

7.4

7.6

7.8

8.0

10.72

11.15

11.60

12.09

12.63

13.22

13.85

14.55

15.45

16.47

17.39

18.17

18.73

19.15

19.45

9.28

8.85

8.40

7.91

7.37

6.78

6.15

5.45

4.55

3.53

2.61

1.83

1.27

0.85

0.55

Na2HPO4分子量 = 14.98，0.2 mol/L溶液为28.40克/升。

Na2HPO4·2H2O分子量 = 178.05，0.2 mol/L溶液含35.01克/升。

C4H2O7·H2O分子量 = 210.14，0.1 mol/L溶液为21.01克/升。

4．柠檬酸–氢氧化钠-盐酸缓冲液

钠离子浓度

（mol/L）

柠檬酸（克）

C6H8O7·H2O

氢氧化钠(克)

NaOH 97%

盐酸（毫升）

HCl（浓）

最终体积（升）①

2.2

3.1

3.3

4.3

5.3

5.8

6.5

0.20

0.35

0.45

0.38

210

245

285

266

144

186

156

160

116

106

105

126

①使用时可以每升中加入1克克酚，若最后pH值有变化，再用少量50% 氢氧化钠溶液或浓盐酸调节，冰箱保存。

5．柠檬酸–柠檬酸钠缓冲液（0.1 mol/L）

0.1 mol/L

柠檬酸

（毫升）

0.1 mol/L

柠檬酸钠

（毫升）

0.1 mol/L

柠檬酸

（毫升）

0.1 mol/L

柠檬酸钠

（毫升）

3.0

3.2

3.4

3.6

3.8

4.0

4.2

4.4

4.6

4.8

18.6

17.2

16.0

14.9

14.0

13.1

12.3

11.4

10.3

9.2

1.4

2.8

4.0

5.1

6.0

6.9

7.7

8.6

9.7

10.8

5.0

5.2

5.4

5.6

5.8

6.0

6.2

6.4

6.6

8.2

7.3

6.4

5.5

4.7

3.8

2.8

2.0

1.4

11.8

12.7

13.6

14.5

15.3

16.2

17.2

18.0

18.6

柠檬酸C6H8O7·H2O：分子量210.14，0.1 mol/L溶液为21.01克/升。

柠檬酸钠Na3 C6H5O7·2H2O：分子量294.12，0.1 mol/L溶液为29.41克/毫升。

6．乙酸–乙酸钠缓冲液（0.2 mol/L）

pH(18℃)

0.2 mol/L

NaAc

(毫升)

0.3 mol/L

HAc

(毫升)

pH(18℃)

0.2 mol/L

NaAc

(毫升)

0.3 mol/L

HAc

(毫升)

2.6

3.8

4.0

4.2

4.4

4.6

0.75

1.20

1.80

2.65

3.70

4.90

9.25

8.80

8.20

7.35

6.30

5.10

4.8

5.0

5.2

5.4

5.6

5.8

5.90

7.00

7.90

8.60

9.10

9.40

4.10

3.00

2.10

1.40

0.90

0.60

Na2Ac·3H2O分子量 = 136.09，0.2 mol/L溶液为27.22克/升。

7．磷酸盐缓冲液

（1）磷酸氢二钠–磷酸二氢钠缓冲液（0.2）

0.2 mol/L

Na2HPO4

(毫升)

0.3 mol/L

NaH2PO4

(毫升)

0.2 mol/L

Na2HPO4

(毫升)

0.3 mol/L

NaH2PO4

(毫升)

5.8

5.9

6.0

6.1

6.2

6.3

6.4

6.5

6.6

6.7

6.8

6.9

8.0

10.0

12.3

15.0

18.5

22.5

26.5

31.5

37.5

43.5

49.5

55.0

92.0

90.0

87.7

85.0

81.5

77.5

73.5

68.5

62.5

56.5

51.0

45.0

7.0

7.1

7.2

7.3

7.4

7.5

7.6

7.7

7.8

7.9

8.0

61.0

67.0

72.0

77.0

81.0

84.0

87.0

89.5

91.5

93.0
94.7

39.0

33.0

28.0

23.0

19.0

16.0

13.0

10.5

8.5

7.0

5.3

Na2HPO4·2H2O分子量 = 178.05，0.2 mol/L溶液为85.61克/升。

Na2HPO4·12H2O分子量 = 358.22，0.2 mol/L溶液为71.64克/升。

Na2HPO4·2H2O分子量 = 156.03，0.2 mol/L溶液为31.21克/升。

（2）磷酸氢二钠–磷酸二氢钾缓冲液（1/15 mol/L）

mol/L/15Na2HPO4

(毫升)

mol/L//15KH2PO4

(毫升)

mol/L//15Na2HPO4

(毫升)

mol/L//15KH2PO4

(毫升)

4.92

5.29

5.91

6.24

6.47

6.64

6.81

6.98

0.10

0.50

1.00

2.00

3.00

4.00

5.00

6.00

9.90

9.50

9.00

8.00

7.00

6.00

5.00

4.00

7.17

7.38

7.73

8.04

8.34

8.67

8.18

7.00

8.00

9.00

9.50

9.75

9.90

10.00

3.00

2.00

1.00

0.50

0.25

0.10

Na2HPO4·2H2O分子量 = 178.05，1/15M溶液为11.876克/升。

KH2PO4分子量 = 136.09，1/15M溶液为9.078克/升。

8．磷酸二氢钾–氢氧化钠缓冲液（0.05M）

X毫升0.2M K2PO4 + Y毫升0.2N NaOH加水稀释至29毫升

pH(20℃)

X (毫升)

Y（毫升）

pH(20℃)

X (毫升)

Y（毫升）

5.8

6.0

6.2

6.4

6.6

6.8

0.372

0.570

0.860

1.260

1.780

2.365

7.0

7.2

7.4

7.6

7.8

8.0

2.963

3.500

3.950

4.280

4.520

4.680

9．巴比妥钠-盐酸缓冲液（18℃）

0.04M巴比妥钠溶液

0.2V盐酸

0.04M巴比妥钠溶液(毫升)

0.2N盐酸(毫升)

6.8

7.0

7.2

7.4

7.6

7.8

8.0

8.2

100
100

100

18.4

17.8

16.7
15.3

13.4

11.47

9.39

7.21

8.4

8.6

8.8

9.0

9.2

9.4

9.6

100

5.21

3.82

2.52

1.65

1.13

0.70

0.35

巴比妥钠盐分子量=206.18;0.04M溶液为8.25克/升

10．Tris–盐酸缓冲液（0.05M，25℃）

50毫升0.1M三羟甲基氨基甲烷（Tris）溶液与X毫升0.1N盐酸混匀后，加水稀释至100毫升。

X(毫升)

7.10

7.20

7.30

7.40

7.50

7.60

7.70

7.80

7.90

8.00

45.7

44.7

43.4

42.0

40.3

38.5

36.6

34.5

32.0
29.2

8.10

8.20

8.30

8.40

8.50

8.60

8.70

8.80

8.90

26.2

22.9
19.9

17.2

14.7

12.4

10.3

8.5

7.0

三羟甲基氨基甲烷（Tris）HOCH2 CH2OH CHOCH2 NH2 分子量=121.14;

0.1M溶液为12.114克/升。Tris溶液可从空气中吸收二氧化碳，使用时注意将瓶盖严。

11．硼酸–硼砂缓冲液（0.2M硼酸根）

0.05M硼砂（毫升）

0.2M硼砂（毫升）

0.05M硼砂（毫升）

0.2M硼酸（毫升）

7.4

7.6

7.8

8.0

1.0
1.5

2.0

3.0

9.0

8.5

8.0

7.0

8.2

8.4

8.7

9.0

3.5

4.5

6.0

8.0

6.5

5.5

4.0

2.0

硼砂Na2B4O7·H2O,分子量=381.43;0.05M溶液（=0.2M硼酸根）含19.07克/升。

硼酸H2BO3,分子量=61.84,0.2M溶液为12.37克/升。

硼砂易失去结晶水，必须在带塞的瓶中保存。

11．硼酸-硼砂缓冲液（0.2M硼酸根）

0.05M硼砂（毫升）

0.2M硼酸（毫升）

0.05M硼砂（毫升）

0.2M硼酸（毫升）

7.4

7.6

7.8

8.0

1.0

1.5

2.0

3.0

9.0
8.5

8.0

7.0

8.2

8.4

8.7

9.0

3.5

4.5

6.0

8.0

6.5

5.5

4.0
2.0

硼砂Na2B4O7·10H2O,分子量=381.43;0.05M溶液（=0.2M硼酸根）含19.07克/升。

硼酸H2BO3，分子量=61.84, 0.2M溶液为12.37克/升。

硼砂易失去结晶水，必须在带塞的瓶中保存。

12．甘氨酸–氢氧化钠缓冲液（0.05M）

X毫升0.2M甘氨酸+Y毫升0.2NnaOH加水稀释至200毫升

8.6

8.8

9.0

9.2

9.4

4.0

6.0

8.8

12.0

16.8

9.6

9.8

10.0

10.4

10.6

22.4

27.2

32.0

38.6

45.5

甘氨酸分子量=75.07;0.2M溶液含15.01克/升。

13．硼砂-氢氧化钠缓冲液（0.05M硼酸根）

X毫升0.05M硼砂+Y毫升0.2NNaOH加水稀释至200毫升

9.3

9.4

9.6

6.0
11.0

23.0

9.8

10.0

10.1

34.0

43.0

46.0

硼砂Na2B4O7·10H2O,分子量=381.43;0.05M溶液为19.07克/升。

14．碳酸钠-碳酸氢钠缓冲液（0.1M）

Ca2+、Mg2+存在时不得使用

0.1MNa2CO3(毫升)

0.1MN2HCO3(毫升)

20℃

37℃

9.16

9.40

9.51

9.78

9.90

10.14

10.28

10.53

10.83

8.77

9.12

9.40

9.50

9.72

9.90

10.08

10.28

10.57

Na2CO2·10H2O分子量=286.2;0.1M溶液为28.62克/升。
N2HCO3分子量=84.0;0.1M溶液为8.40克/升。

15．“PBS”缓冲液

7.6

7.4

7.2

7.0

H2O

NaCl

Na2HPO4

NaH2PO4

1000

8.5

2.2

0.1

1000

8.5

2.2

0.2

1000

8.5

2.2

0.3

100ml

8.5g

2.2g

0.4g

路过

雷人

鸡蛋

握手

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