|
分子式:C21H20BrN3,为芳香族荧光化合物
英文名:Ethidium bromide (简称EB)
分子量: 394.3139 g/mol
熔点:260 - 262 °C
EB(Ethidium bromide,溴化乙锭)溴化乙锭是一种高度灵敏的荧光染色剂,用于观察琼脂糖和聚丙烯酰胺凝胶中的DNA。溴化乙锭用标准302nm 紫外光透射仪激发并放射出橙红色信号,可用Polaroid 底片或带CCD 成像头的凝胶成像处理系统拍摄。
化乙锭可以嵌入碱基分子中,导致错配。溴化乙锭是强诱变剂,具有高致癌性!
观察琼脂糖凝胶中DNA最常用的方法是利用荧光染料溴化乙锭进行染色,溴化乙锭含有一个可以嵌入DNA堆积碱基之间的一个三环平面基团。它与DNA的结合几乎没有碱基序列特异性。在高离子强度的饱和溶液中,大约每2.5个碱基插入一个溴化乙锭分子。当染料分子插入后,其平面基团与螺旋的轴线垂直并通过范德华力与上下碱基相互作用。这个基团的固定位置及其与碱基的密切接近,导致与DNA结合的染料呈现荧光,其荧光产率比游离溶液中染料有所增加。DNA吸收254nm处的紫外辐射并传递给染料,而被结合的染料本身吸收302nm和366nm的光辐射。这两种情况下,被吸收的能量在可见光谱红橙区的590nm处重新发射出来。由于溴化乙锭-DNA复合物的荧光产率比没有结合DNA的染料高出20-30倍,所以当凝胶中含有游离的溴化乙锭(0.5ug/ml)时,可以检测到少至10ng的NDA条带。
废弃溴化乙锭EB净化和处理方法
实验室中经常有EB被打翻或EB废弃物的处理问题,如何做到标准处理?
1 严禁随便丢弃。因为EB是强致癌性,而且易挥发,挥发至空气中,危害很大。
2 废 EB溶液的处理方法
(1) 对于EB含量大于0.5mg/ml的溶液,可如下处理:
a. 将EB溶液用水稀释至浓度低于0.5mg/ml;
b. 加入一倍体积的0.5mol/L KMnO4 ,混匀,再加入等量的25mol/L HCl,混匀,置室温数小时;
c. 加入一倍体积的2.5mol/L NaOH,混匀并废弃。
(2) EB含量小于0.5mg/ml的溶液可如下处理:
a. 按1mg/ml的量加入活性炭,不时轻摇混匀,室温放置1小时;
b. 用滤纸过滤并将活性碳与滤纸密封后丢弃。
3 废EB接触物,如抹布,枪头。一般回收至黑色的玻璃瓶中,定期进行焚烧处理。
存档|手机版|返回页顶|客家风情——客家人·客家网 HakkaOnline.com
GMT+8, 2024-4-29 09:37
Powered by Discuz! X3.5
Copyright © 2024 https://www.hakkaonline.com